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人內皮型NO合酶(eNOS)ELISA-測活性

人內皮型NO合酶(eNOS)ELISA-測活性

產品型號: 96T/48T

所屬分類:人的ELISA

產品時間:2025-07-05

簡要描述:人內皮型NO合酶(eNOS)ELISA試劑盒價格公道、*,售后服務完整,并提供免費代檢測服務!本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中內皮型NO合酶(eNOS)的含量活性。

詳細說明:

內皮型NO合酶(eNOS)ELISA試劑盒實驗原理

本試劑僅供研究使用       目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中內皮型NO合酶(eNOS含量活性。

實驗原理:

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中內皮型NO合酶(eNOS水平。用純化的eNOS抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入內皮型NO合酶(eNOS,再與HRP標記的eNOS抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的內皮型NO合酶(eNOS呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中內皮型NO合酶(eNOS濃度。

 

試劑盒組成

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

保存

說明書

1

1

 

封板膜

2片(48

2片(96

 

密封袋

1

1

 

酶標包被板

1×48

1×96

2-8保存

標準品:54U/L

0.5ml×1

0.5ml×1

2-8保存

標準品稀釋液

1.5ml×1

1.5ml×1

2-8保存

酶標試劑

3 ml×1

6 ml×1

2-8保存

樣品稀釋液

3 ml×1

6 ml×1

2-8保存

顯色劑A

3 ml×1

6 ml×1

2-8保存

顯色劑B

3 ml×1

6 ml×1

2-8保存

終止液

3ml×1

6ml×1

2-8保存

濃縮洗滌液

20ml×20倍)×1

20ml×30倍)×1

2-8保存

 

樣本處理及要求

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。

2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。

3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBSPH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBSPH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8的溫度。加入一定量的PBSPH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20保存,但應避免反復凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

注意事項:

1.  試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

2.  濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

3.  各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

4.  請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

5.  封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.  底物請避光保存。

7.  嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8.  所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9.  本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

試劑盒性能:

1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.92以上。

2.批內與批間應分別小于9%15%

檢測范圍:                                             

1U/L – 40U/L       

保存條件及有效期:

1.試劑盒保存:2-8。

2.有效期:6個月



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